蘭花組織培養(yǎng)大多用莖尖和花序上的芽,因?yàn)槿~尖培養(yǎng)的植株變異較大,難以控制。操作前工具必須再次在酒精燈火焰上消毒,并在無菌條件下取材。以莖尖培養(yǎng)為例,要選擇生長(zhǎng)旺盛的植株,切下莖頂端2~3厘米長(zhǎng)的一段,若莖長(zhǎng)而巨大,亦可切下5~8厘米或更長(zhǎng)。先用無菌水清洗干凈,除去殘留的鞘、葉基等,再在70%~75%酒精中浸泡10~30秒,取出后在5%~10%漂白粉溶液中浸10~15分鐘,再用無菌水沖洗干凈。
然后在無菌解剖鏡下剝掉幼葉,用小刀切取小芽塊。小芽塊的體積不宜太大,太大不利于脫毒,太小也不易培養(yǎng),一般以0.2~1mm為宜,可根據(jù)不同的品種靈活掌握。若用花序,大多選取已開有少數(shù)花的健壯花序,切取帶有花梗和芽的節(jié)段,方法與莖尖切割相似。剝離與切割都應(yīng)特別注意在無菌條件下操作。
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