結(jié)果
2.1革蘭氏染色法初步鑒定細菌
結(jié)果表明:紅色菌落的菌株為微球菌,乳白色菌落的菌株為葡萄球菌,均為革蘭氏陽性菌。
2.2抑菌劑對抑菌強度的影響 6種抑菌劑中,多菌靈除了不能有效抑制葡萄球菌和杜氏青霉外,對其他菌種抑制效果比較明顯;Yl一1和代森猛鋅對供試的6種菌抑菌作用具廣譜性,但不能較好地抑制杜氏青霉,僅能在其生長初期18h內(nèi)有抑制作用,24h后抑菌圈逐漸被蔓延的菌絲覆蓋;冠菌清和撲海因?qū)ι鲜?種病原菌無抑菌作用,百菌清僅對黑曲霉有微小抑制作用(見圖1).因而,本實驗篩選多菌靈、Yl一1和代森猛鋅對微球菌、葡萄球菌、棕曲霉、黑青霉作進一步實驗。
2.3最低抑菌濃度測定
由表2可以看出,多菌靈對微球菌最低抑菌濃度是15.625mg/L;Yl一1對微球菌、葡萄球菌最低抑菌濃度均是62.5mg/L;代森猛鋅對微球菌、葡萄球菌最低抑菌濃度分別是250、62.5mg/L
2.4抑菌劑對霉菌菌絲生長的影響
多菌靈對棕曲霉、黑青霉菌絲生長抑制作用最強,不同濃度的多菌靈在10d內(nèi)觀察,菌絲生長相對抑制率均為100%;Yl一1對菌絲生長的抑制作用次之,其對棕曲霉菌絲生長的最低抑菌濃度為15.625mg/L,對黑青霉菌絲生長最低抑菌濃度為7.8125mg/L,第10天的抑制率分別為100%和97.4%;而代森猛鋅相比之下抑制作用最弱,其對棕曲霉和黑青霉菌絲生長最低抑菌濃度均為125mg/L,第2天的抑制率分別為95.5%和100%.
2.5抑菌劑對孢子萌發(fā)的影響
根據(jù)表1、2及圖1的結(jié)果,選擇抑菌作用具廣譜性的Yl一1作以下實驗。
結(jié)果表明:Yl一1對棕曲霉、黑青霉孢子萌發(fā)具有明顯的抑制作用。0.9765625mg/L創(chuàng)的Yl一1對棕曲霉孢子萌發(fā)抑制率仍可達60.0%,對黑青霉泡子萌發(fā)抑制率可高達80.8%,并可使黑青霉孢子形態(tài)大小不一,而大于0.9765625mg/L的Yl一1可完全抑制棕曲霉和黑青霉孢子的萌發(fā)。
2.6Yl一1對植物生長的影響和開放組培初探(見表3)
根據(jù)表2,選擇濃度為1000,250,62.5mg/L分別代表高、中、低3種濃度.實驗結(jié)果表明:高濃度和中濃度的Yl一1對馬鈴薯試管苗生根、發(fā)育有明顯的抑制作用,而低濃度的YI一1不僅能有效抑制試管苗的污染情況,而且對試管苗的生長發(fā)育無抑制作用(見圖3).在開放組培初探實驗中,對照污染率為33.3%,高、中、低3種濃度污染率均為零。
3、討論
上述6種病原菌進行體外抑菌實驗結(jié)果表明,多菌靈不能有效抑制微球菌和杜氏青霉,代森猛鋅雖對黑曲霉有較強的抑制作用,但對棕曲霉和黑青霉菌絲生長抑制作用較弱,而Yl一1對以上菌種都有不同程度的抑制作用,抑菌作用具廣譜性。Yl一1對微球菌、葡萄球菌的最低抑菌濃度均為62.5mg/L;對棕曲霉菌絲生長最低抑菌濃度為15.625mg/L,對黑青霉菌絲生長最低抑菌濃度為7.8125mg/L;對棕曲霉、黑青霉孢子萌發(fā)最低抑菌濃度均為3.90625mg/L。在對植物生長影響試驗中,62.5mg/L的YI一1對馬鈴薯試管苗生根、分化及生長無抑制作用,且在開放組培中未發(fā)生污染。因而,從抑菌作用的廣譜性、顯著性及對植物生長無抑制作用這3個角度出發(fā),本試驗研究表明,Yl一1可用作植物組織培養(yǎng)中的抑菌劑。
在開放組培初探中,Yl一1在2Od中能有效抑制試管苗的污染,使開放組培的實現(xiàn)成為可能。關(guān)于Yl一1的抑菌機理還有待于進一步研究。
2.1革蘭氏染色法初步鑒定細菌
結(jié)果表明:紅色菌落的菌株為微球菌,乳白色菌落的菌株為葡萄球菌,均為革蘭氏陽性菌。
2.2抑菌劑對抑菌強度的影響 6種抑菌劑中,多菌靈除了不能有效抑制葡萄球菌和杜氏青霉外,對其他菌種抑制效果比較明顯;Yl一1和代森猛鋅對供試的6種菌抑菌作用具廣譜性,但不能較好地抑制杜氏青霉,僅能在其生長初期18h內(nèi)有抑制作用,24h后抑菌圈逐漸被蔓延的菌絲覆蓋;冠菌清和撲海因?qū)ι鲜?種病原菌無抑菌作用,百菌清僅對黑曲霉有微小抑制作用(見圖1).因而,本實驗篩選多菌靈、Yl一1和代森猛鋅對微球菌、葡萄球菌、棕曲霉、黑青霉作進一步實驗。
由表2可以看出,多菌靈對微球菌最低抑菌濃度是15.625mg/L;Yl一1對微球菌、葡萄球菌最低抑菌濃度均是62.5mg/L;代森猛鋅對微球菌、葡萄球菌最低抑菌濃度分別是250、62.5mg/L
2.4抑菌劑對霉菌菌絲生長的影響
多菌靈對棕曲霉、黑青霉菌絲生長抑制作用最強,不同濃度的多菌靈在10d內(nèi)觀察,菌絲生長相對抑制率均為100%;Yl一1對菌絲生長的抑制作用次之,其對棕曲霉菌絲生長的最低抑菌濃度為15.625mg/L,對黑青霉菌絲生長最低抑菌濃度為7.8125mg/L,第10天的抑制率分別為100%和97.4%;而代森猛鋅相比之下抑制作用最弱,其對棕曲霉和黑青霉菌絲生長最低抑菌濃度均為125mg/L,第2天的抑制率分別為95.5%和100%.
2.5抑菌劑對孢子萌發(fā)的影響
根據(jù)表1、2及圖1的結(jié)果,選擇抑菌作用具廣譜性的Yl一1作以下實驗。
結(jié)果表明:Yl一1對棕曲霉、黑青霉孢子萌發(fā)具有明顯的抑制作用。0.9765625mg/L創(chuàng)的Yl一1對棕曲霉孢子萌發(fā)抑制率仍可達60.0%,對黑青霉泡子萌發(fā)抑制率可高達80.8%,并可使黑青霉孢子形態(tài)大小不一,而大于0.9765625mg/L的Yl一1可完全抑制棕曲霉和黑青霉孢子的萌發(fā)。
2.6Yl一1對植物生長的影響和開放組培初探(見表3)
根據(jù)表2,選擇濃度為1000,250,62.5mg/L分別代表高、中、低3種濃度.實驗結(jié)果表明:高濃度和中濃度的Yl一1對馬鈴薯試管苗生根、發(fā)育有明顯的抑制作用,而低濃度的YI一1不僅能有效抑制試管苗的污染情況,而且對試管苗的生長發(fā)育無抑制作用(見圖3).在開放組培初探實驗中,對照污染率為33.3%,高、中、低3種濃度污染率均為零。
3、討論
上述6種病原菌進行體外抑菌實驗結(jié)果表明,多菌靈不能有效抑制微球菌和杜氏青霉,代森猛鋅雖對黑曲霉有較強的抑制作用,但對棕曲霉和黑青霉菌絲生長抑制作用較弱,而Yl一1對以上菌種都有不同程度的抑制作用,抑菌作用具廣譜性。Yl一1對微球菌、葡萄球菌的最低抑菌濃度均為62.5mg/L;對棕曲霉菌絲生長最低抑菌濃度為15.625mg/L,對黑青霉菌絲生長最低抑菌濃度為7.8125mg/L;對棕曲霉、黑青霉孢子萌發(fā)最低抑菌濃度均為3.90625mg/L。在對植物生長影響試驗中,62.5mg/L的YI一1對馬鈴薯試管苗生根、分化及生長無抑制作用,且在開放組培中未發(fā)生污染。因而,從抑菌作用的廣譜性、顯著性及對植物生長無抑制作用這3個角度出發(fā),本試驗研究表明,Yl一1可用作植物組織培養(yǎng)中的抑菌劑。
在開放組培初探中,Yl一1在2Od中能有效抑制試管苗的污染,使開放組培的實現(xiàn)成為可能。關(guān)于Yl一1的抑菌機理還有待于進一步研究。
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