（一）實(shí)踐目的
    在上次實(shí)踐基礎(chǔ)上進(jìn)一步學(xué)習(xí)愈傷組織培養(yǎng)的胚軸切割轉(zhuǎn)接技術(shù)，加深對(duì)愈傷組織的理解。

    （二）實(shí)踐地點(diǎn)和時(shí)間
    植物組培室、建議4學(xué)時(shí)
    （三）實(shí)踐用具與材料
    超凈工作臺(tái)、手術(shù)剪、槍狀鑷、解剖刀或刀片、酒精燈、酒精瓶、紗布、高壓滅菌鍋、電子天平、盛物籃、記號(hào)筆。無(wú)菌播種已萌發(fā)青豆、無(wú)菌播種已萌發(fā)豌豆、大量元素、微量元素、維生素、鐵鹽、BA、2,4—D等母液。
    （四）實(shí)踐步驟
    1、制備培養(yǎng)基
    為試驗(yàn)觀察生長(zhǎng)物質(zhì)對(duì)愈傷組織的影響，加深理解，可做對(duì)比試驗(yàn)，制備三種培養(yǎng)基
    配方1MS+0.1ml/LBA+0.5ml/L2.4—D
    配方2MS+0.5ml/LBA+0.1ml/L2.4—D
    配方3MS
    2、下胚軸的切割轉(zhuǎn)接
    （1）進(jìn)行超凈工作臺(tái)開(kāi)啟紫外燈、風(fēng)機(jī)，換鞋、穿工作服、清潔雙手等常規(guī)操作。檢查酒精燈、酒精瓶是否該加酒精。
    （2）將上周無(wú)菌播種成活，已經(jīng)萌芽的種子放入超凈工作臺(tái)，仔細(xì)觀察種子，把污染的淘汰掉。
    （3）灼燒鑷子和解剖刀刀片，冷卻，注意不能傷手。
    （4）用工具將萌發(fā)種子放入培養(yǎng)皿內(nèi)濾紙上，看清楚的胚軸位置，用鑷子和解剖刀刀片等器械除去子葉和胚根，切割胚軸成5mm左右切段。
    （5）將切割下來(lái)的胚軸移入新培養(yǎng)基內(nèi)，做好標(biāo)記，三種配方分別移入標(biāo)記，放入培養(yǎng)室培養(yǎng)。
    3、清潔整理
    按常規(guī)清潔整理超凈工作臺(tái)和實(shí)驗(yàn)室，注意超凈工作臺(tái)不能用酒精擦拭，地面可用洗衣粉拖地，接種室可進(jìn)行甲醛加高錳酸鉀熏蒸，為以后的實(shí)驗(yàn)作準(zhǔn)備。
    （五）實(shí)訓(xùn)作業(yè)
    寫(xiě)出本次實(shí)踐報(bào)告，并寫(xiě)出自己的實(shí)踐效果和體會(huì)
    （六）評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
    胚軸識(shí)別清楚，胚軸切割轉(zhuǎn)接操作正確，愈傷組織分化成活高，污染小。