紫萁(OsmundaJaponicaThunb．)是一種具有明顯世代交替的多年生蕨類經(jīng)濟植物，無性世代時間長，切割分蔸進行無性養(yǎng)殖操作難度大，功效低，養(yǎng)殖系數(shù)不高．蕨類植物屬相對低等的較原始的類群，自然養(yǎng)殖能力弱，是因為孢子萌發(fā)、原葉體形成、受精、孢子體形成與生長受到許多環(huán)境因素的影響，限制性因素難以在特定時間保證。何義發(fā)在田間運用“三段式”育苗培蔸方法，將孢子粉通過有性養(yǎng)殖培育了孢子體幼苗。袁藝、田勝尼、張敏等都以紫萁孢子體作為外植體得到了試管苗。目前還沒有愈傷組織誘導成功的報道，但馬玉心等對薇菜的的另一個種分株紫萁進行了組織培養(yǎng)研究，成功地組織，并繼代、生根、得到試管苗，對紫萁愈傷組織的誘導很有借鑒意義。本文利用孢子粉和孢子囊兩種外植體，初步摸索出紫萁原葉體和幼孢子體階段的無菌培養(yǎng)條件，以期為紫其野生轉(zhuǎn)家種探討出一套科學的人工栽培技術(shù)提供理論基礎(chǔ)，為探索適用的快速養(yǎng)殖技術(shù)，達到高效、低成本的目的提供技術(shù)支持。

    2、材料與方法
    2．1試驗材料
    試驗材料均于5月份采集孢子囊即將成熟但未散落的孢子葉，將孢子葉抖落于白紙上或剪下裝入紙袋中，自然后熟干燥1-2d，收集孢子粉。
    2．2試驗方法
    由于通過常規(guī)愈傷組織途徑很難誘導出愈傷組織，本試驗僅利用孢子萌發(fā)途徑探討紫萁的組織培養(yǎng)技術(shù)。
    采用以下兩種方式：
    a．取孢子囊完好的孢子葉小葉流水沖洗，于70%酒精和0.1%升汞溶液中浸泡，無菌水沖洗數(shù)次，切成0.5～1cm的小段，接種子附加不同激素的MS和1／2MS培養(yǎng)基上，于25+2℃，光照(40umol/s/m2，12h／d)培養(yǎng)，30d后按下式計算孢子萌發(fā)率：
    萌發(fā)率=孢子囊變綠并長出原葉體的孢子葉塊數(shù)／接種的孢子葉塊數(shù)×100%
    b．將后熟散落的孢子粉于水杯中攪拌后靜置數(shù)分鐘，棄上層液和雜質(zhì)，除去底部沉淀，再在經(jīng)高溫滅菌的漏斗濾紙中，用70%酒精和0.1%升汞分別過濾，達到時間棄去上層多余的消毒液，無菌水浸洗數(shù)次，涂布于1／2MS培養(yǎng)基上。
    以上所有基本培養(yǎng)基均添加2.0%蔗糖+0.6%瓊脂粉+200mg／LKH2P04+0.2%活性炭，pH=5.8。每次結(jié)果重復三次取平均值。