摘要：降香提取物作為一種中藥復(fù)方組分，可以用來(lái)治療心血管疾病。一般采用水蒸氣蒸餾法，從降香植物的根或莖中提取，本研究采用超臨界CO2流體萃取技術(shù)從降香葉中提取其藥用有效成分，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)，得到最佳工藝工條件是：萃取壓力30MPa，萃取溫度40℃，夾帶劑量400mL，原料粒度0.8mm，而采用水蒸氣蒸餾法產(chǎn)物收率極低。表明超臨界CO2萃取法優(yōu)于水蒸氣蒸餾法。

    關(guān)鍵詞：超臨界CO2；萃??；降香葉；水蒸氣蒸餾法
    中圖分類號(hào)：R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-7717（2008）04-0767-02
    隨著人們對(duì)可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略認(rèn)識(shí)的不斷加強(qiáng)，清潔生產(chǎn)技術(shù)受到越來(lái)越廣泛的重視，人們正在致力于尋找和開(kāi)發(fā)各種節(jié)能、環(huán)保型的“綠色化學(xué)技術(shù)”。而擁有近30年發(fā)展歷史的超臨界流體萃取（Supercritical Fluid Extraction，簡(jiǎn)稱SFE）技術(shù)作為一種獨(dú)特、高效、清潔的新興分離方法，在天然產(chǎn)物有效成分提取與分離方面展現(xiàn)出了勃勃生機(jī)[1-2]。加強(qiáng)對(duì)SFE技術(shù)的研究和推廣，對(duì)我國(guó)實(shí)現(xiàn)中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化，促進(jìn)中草藥資源的開(kāi)發(fā)均具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。
    降香提取物是一種有價(jià)值的中藥成分，用降香提取物和丹參制成香丹注射液具有行血活氣、止痛、止血、擴(kuò)張血管、增進(jìn)冠狀動(dòng)脈血流量等作用，適用于治療心血管、腦血管、心絞痛等疾病。傳統(tǒng)方法都是以降香的根或莖為原料，用水蒸氣蒸餾法提取，但收率低，成本高。葛發(fā)歡等人采用超臨界CO2萃取技術(shù)從降香植物的莖和根中提取進(jìn)行了研究[3]。本研究探索以降香葉為原料，采用SFE技術(shù)提取其具有藥用價(jià)值的成分——揮發(fā)油、降香黃酮、桂皮酰酚類、原兒茶醛等（用GC-MS-DS法分析），這對(duì)擴(kuò)大降香原料來(lái)源，探索新型清潔提取方法，具有重要的理論和實(shí)用價(jià)值[4]。
    1、實(shí)驗(yàn)
    1.1主要儀器HL－2L/50MPa－ⅡBQW型超臨界CO2萃取裝置（杭州華黎實(shí)業(yè)有限公司）；水蒸氣蒸餾裝置一套（天津玻璃儀器廠）；上分1102氣相色譜儀一套（上海分析儀器廠），HP5988A氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)惠普公司）等。
    1.2原材料降香葉：產(chǎn)于海南島，由安格集團(tuán)提供；CO2（A.R）：廣州金珠江化工廠產(chǎn)品，純度>99.5％；無(wú)水乙醇（A.R）：廣州番禺力強(qiáng)化工廠等。
    1.3實(shí)驗(yàn)方法分別用水蒸氣蒸餾法和超臨界CO2萃取法對(duì)降香葉有效成分進(jìn)行提取。超臨界CO2萃取的工藝路線簡(jiǎn)單示意見(jiàn)圖1。
    實(shí)驗(yàn)操作步驟：將粉碎的降香葉300g投入萃取釜中，封閉系統(tǒng)后，對(duì)蒸發(fā)器罐進(jìn)行冷卻，對(duì)萃取釜、分離釜Ⅰ、分離釜Ⅱ進(jìn)行加熱，當(dāng)溫度分別達(dá)到預(yù)先設(shè)定值時(shí)，進(jìn)行SFE-CO2萃取操作，打開(kāi)CO2氣瓶送氣，并打開(kāi)高壓泵對(duì)萃取釜、分離釜Ⅰ、分離釜Ⅱ加壓，當(dāng)壓力分別達(dá)到實(shí)驗(yàn)所需值時(shí)，開(kāi)始循環(huán)萃取，并注入夾帶劑（無(wú)水乙醇），恒溫橫壓萃取2.5h，出料。
    超臨界CO2萃取實(shí)驗(yàn)采用4因素3水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)［5］。
    水蒸氣蒸餾法的操作按照參考文獻(xiàn)[6]的方法進(jìn)行。即取100g粉碎的降香葉，裝入水蒸氣蒸餾裝置中，加入適量水，加熱蒸餾，收集餾出物。
    香丹注射液檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)（由江蘇安格藥業(yè)有限公司提供）：取本品2mL，置分液漏斗中，加石油醚（30～60℃）10mL，振搖提取，分取石油醚層，殘?jiān)?%香草醛硫酸溶液1～2滴，即顯棕紅色，放置后漸變紫紅色。
    2、結(jié)果與討論
    2.1正交試驗(yàn)影響因素的確定見(jiàn)表1。
    由于SFE-CO2提取與分離一體化，可以通過(guò)合適的工藝設(shè)計(jì)將極性不同于目標(biāo)組分的成分剔除，并且在整個(gè)提取過(guò)程中可以很方便地取樣并對(duì)那些已知的有效成分進(jìn)行跟蹤分析，從而既可得到指標(biāo)成分可控的制劑產(chǎn)品，又可避免因藥材的來(lái)源不同而帶來(lái)的種種困難。為確定超臨界CO2萃取降香葉的最佳工藝條件，設(shè)計(jì)了4因素3水平的正交試驗(yàn)L9(34)[5]，具體見(jiàn)表1。夾帶劑通過(guò)改變超臨界流體極性和密度，可以大大促進(jìn)超臨界CO2流體對(duì)極性物質(zhì)的溶解和萃取[7]。
    2.2正交試驗(yàn)—超臨界CO2萃取工藝參數(shù)的優(yōu)化從表2可以看出，本實(shí)驗(yàn)的影響因素的次序?yàn)锳>B>D>C,本實(shí)驗(yàn)的最優(yōu)化工藝條件為:A3 B2 C3 D3，即萃取壓力30 MPa，萃取溫度40℃，夾帶劑量400mL，顆粒度為0.8mm。
    2.3降香SCF-CO2萃取液的鑒定結(jié)果根據(jù)香丹注射液標(biāo)準(zhǔn)做降香超臨界-CO2萃取液的鑒別，結(jié)果均呈現(xiàn)正反應(yīng)，但顯色反應(yīng)深淺不同，見(jiàn)表3。
    由表3可以看出，本實(shí)驗(yàn)5＃、8＃與優(yōu)化條件萃取液B的顏色與藥用香丹注射液相同，均為紫紅色，說(shuō)明根據(jù)本研究而制定的最優(yōu)超臨界-CO2萃取條件，可以有效的將降香中藥用有效成分提取出來(lái)，并且本研究的萃取率與藥用有效成分之間存在正相關(guān)的關(guān)系。
    2.4SFE提取與常規(guī)提取方法比較用SFE法和常規(guī)水蒸氣蒸餾方法對(duì)比，采用水蒸氣蒸餾法對(duì)降香葉進(jìn)行提取只能得到很微量的產(chǎn)品，提取時(shí)間延長(zhǎng)至8～9h，收效甚微（試驗(yàn)結(jié)果此略），這可能是由于提取溫度高，在提取過(guò)程降香藥用有效成分發(fā)生了水解、分解反應(yīng)，造成收率極低的緣故。
    而SFE法，萃取時(shí)間大大縮短（本實(shí)驗(yàn)為2.5h），而且萃取率顯著提高（采用優(yōu)化工藝可以打到4％以上），且提取溫度接近室溫，避免了水蒸氣蒸餾可能發(fā)生的分解反應(yīng)，保留了天然組分本身的特征和成分。
    3、結(jié)論
    影響超臨界CO2萃取降香葉揮發(fā)油、降香黃酮等藥用有效成分的主要因素依次為：萃取壓力、萃取溫度、顆粒度、夾帶劑用量等因素，得出正交試驗(yàn)最佳工藝條件為A3 B2 C3 D3，即萃取壓力30M/Pa、萃取溫度40℃，夾帶劑用量400mL，顆粒度為0.8mm。
    利用SFE-CO2萃取降香葉中的藥用有效成分，與傳統(tǒng)的水蒸氣蒸餾法相比，具有時(shí)間短，收率高，操作溫度低，產(chǎn)品穩(wěn)定性好等特點(diǎn)，是符合環(huán)境友好的綠色化工，同以SFE-CO2萃取降香植物的根莖相比，萃取率較高，同時(shí)又可以起到擴(kuò)大原料來(lái)源，降低成本的目的。
    參考文獻(xiàn)
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    [2]詹玉石,段惠茹,李黨紅,等. 超臨界流體萃取技術(shù)在中藥材提取中的應(yīng)用［J］.北京中醫(yī)，2004，23（3）：184-185.
    [3]葛發(fā)歡，林秀仙，黃曉芬，等.復(fù)方丹參降香的超臨界CO2萃取研究[J].中藥材，2001，24（1）:46-48.
    [4]Zhao Qian, Guo Jixian, Zhang Yunyi. Chemical and Pharmacological Research Progress of Chinese Drug “JiangXiang”(Lignum Dalbergia Odoriferae) [J]. Journal of Chinese Pharmacological Science，2000,9(1):1-5.
    [5]北京大學(xué)數(shù)學(xué)力學(xué)系概率統(tǒng)計(jì)組.正交試驗(yàn)[M].北京：人民教育出版社，1976：207-234.
    [6]張友蘭.有機(jī)精細(xì)化學(xué)品合成及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005，245-247.
    [7]胡愛(ài)軍，丘泰球，梁漢華.超臨界流體萃取強(qiáng)化技術(shù)及應(yīng)用[J].精細(xì)化工，2001，18（12）：736-737.