摘要：以新紅星蘋果花芽為材料，探索適合蛋白質(zhì)的提取方法及其雙向電泳的條件。采用物理和化學(xué)2種方法充分裂解植物組織細(xì)胞，并用低溫操作加入PVP等去除植物大量的酚類物質(zhì)，最后離心去除不溶性雜質(zhì)的蘋果蛋白質(zhì)組雙向電泳(2－DE)樣品制備方法，第1向?yàn)镮SO～DALT等電聚焦，第2向?yàn)榇怪逼桨錝DS－PAGE。通過對樣品制備、雙向電泳參數(shù)的選擇及染色等方面進(jìn)行優(yōu)化，電泳圖譜可分辨出蛋白質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)在519個(gè)以上，蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量約為14.0～97.0 ku，主要分布為14.0～67.0 ku；等電點(diǎn)約為3.5～9.0，主要分布在4.0～7.0。

    關(guān)鍵詞：蘋果；蛋白質(zhì)；雙向電泳
    中圖分類號：S661．1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A　文章編號：1009-9980(2007)04-549-04
    隨著功能基因組學(xué)的興起，蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)技術(shù)已成為生命科學(xué)研究的重點(diǎn)，同時(shí)給果樹花芽分化分子機(jī)理研究帶來了新的機(jī)遇。雙向電泳技術(shù)是蛋白質(zhì)組研究的3大關(guān)鍵核心技術(shù)之首。其基本原理是：第1向?yàn)榈入娋劢?18081ectrofocusing，IEF)，根據(jù)蛋白等電點(diǎn)不同進(jìn)行分離；第2向?yàn)镾DS聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)，是基于蛋白質(zhì)亞基分子質(zhì)量不同，將第1向分離后的蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。蛋白質(zhì)經(jīng)過電荷和質(zhì)量的2次分離后，可以得到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)和分子量的信息。