關(guān)鍵詞 三葉青 組織培養(yǎng) 快速養(yǎng)殖
    三葉青又名有角烏蘞莓、石老鼠，為葡萄科崖爬藤屬植物三葉崖爬藤。主要分布于長(zhǎng)江以南地區(qū)，但多年來(lái)三葉青被毀滅性挖取，種源稀少。筆者應(yīng)用組織培養(yǎng)進(jìn)行快速養(yǎng)殖研究，以期解決資源緊缺問(wèn)題。

    1材料
    1.1藥材：試驗(yàn)材料采自安徽省，外植體取莖尖、帶腋芽的莖段和葉片。
    1.2培養(yǎng)基：基本培養(yǎng)基為M S按不同處理方案添加不同類(lèi)型的植物激素，用0.1N NaOH和0.1N HCL調(diào)節(jié)pH值為5.8~6.0，在高壓滅菌鍋中高溫(121℃)滅菌20min。上述培養(yǎng)基均加3％蔗糖、1％瓊脂，培養(yǎng)室溫度25℃左右，每天光照13h，光照強(qiáng)度2000 1x左右。移栽基質(zhì)經(jīng)過(guò)滅菌消毒處理，按m(珍珠巖)：m（草炭）：m（菜園土）=1∶1∶1比例混合。
    2試驗(yàn)方法與結(jié)果
    2.1樣品處理：取莖尖、莖段（帶芽）和葉為外植體，按下列程序進(jìn)行消毒：
    取材→自來(lái)水粗洗→5％洗衣粉水溶液漂洗5min→自來(lái)水沖洗30min→75％乙醇擦洗表面→0.1％升汞溶液中消毒5min→2％次氯酸鈉溶液中消毒20min→無(wú)菌水沖洗4~6次，然后在無(wú)菌工作臺(tái)中將外植體切成0.5~1.0cm長(zhǎng)的小段。
    2.2誘芽培養(yǎng)：分別將不同部位的外植體接種到表1各培養(yǎng)基中，觀察出芽情況，計(jì)算誘芽率。
    不同植體對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)不一樣，在由3號(hào)培養(yǎng)基的激素濃度配比下試驗(yàn)結(jié)果（見(jiàn)表2）。
    2.3繼代增殖：將誘導(dǎo)出來(lái)的愈傷組織及芽叢轉(zhuǎn)到新的3種不同激素組合的培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng)。將初代培養(yǎng)的芽叢分離并切割成2cm的莖段，接種于培養(yǎng)基MS+NAA 0.2；MS+6?BA 0.02+NAA 0.5；MS+6?BA 2+NAA 0.2。接種后給予全天光照，室溫20~28℃。1周后腋芽萌動(dòng)且萌蘗生長(zhǎng)很快。
    2.4生根培養(yǎng)：不同激素組合對(duì)其生根狀況影響較大(表4)。將誘導(dǎo)成活的叢生芽切割成單芽，分別轉(zhuǎn)接到表3各培養(yǎng)基中(每瓶接1個(gè)芽)，30 d后4號(hào)培養(yǎng)基的生根率最高達(dá)74%。
    2.5移栽定植：芽長(zhǎng)到3~4cm時(shí)，切取健壯的植株轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上，所有的植株都能正常生長(zhǎng)，培養(yǎng)1周后，即誘導(dǎo)出根，10d后每株可長(zhǎng)出3～5條根，根長(zhǎng)達(dá)4～5cm。再培養(yǎng)1周，植株健壯，葉色濃綠，然后揭去紙蓋練苗。輕輕洗去根部培養(yǎng)基，移到蛭石的小盆中，蓋上塑料膜及燒杯，保持較高的溫度，10d后揭去塑料膜及燒杯，可移栽到大田，小苗成活率95％。
    3小結(jié)
    對(duì)三葉青不同部位的外植體進(jìn)行誘導(dǎo)，在相同消毒處理下和同種培養(yǎng)基中，最佳誘導(dǎo)外植體為莖尖。初代培養(yǎng)過(guò)程中以3號(hào)培養(yǎng)基為最佳,生根培養(yǎng)基以4號(hào)為最佳。6?BA在三葉青的繼代培養(yǎng)中的作用可以忽略不計(jì)，可以認(rèn)為MS+NAA 0.2是最佳組合的繼代增殖培養(yǎng)基。