嚴(yán)格地說,一般的組織分離并不能達(dá)到菌種脫毒的目的,這是由于子實(shí)體在生長中后期,攜帶病毒、病菌的概率相當(dāng)高,故脫毒效果不明顯。而將食用菌尖端生長點(diǎn)進(jìn)行脫毒,效果理想。具體的脫毒方法如下:使用規(guī)格為90毫米或110毫米的培養(yǎng)皿,或用規(guī)格為25毫米×200毫米的大型試管。先按常規(guī)制備母種培養(yǎng)基,裝入三角瓶,用棉塞封口,加牛皮紙包封,同時(shí)將培養(yǎng)皿洗凈后用牛皮紙包好。二者同時(shí)進(jìn)行滅菌處理。滅菌器內(nèi)壓力為零時(shí),取出滅菌物,放入接種箱。打開牛皮紙包封,一手持培養(yǎng)皿,一手持三角瓶,利用手指調(diào)控使培養(yǎng)皿上蓋開啟約1~2厘米,倒入培養(yǎng)基液體10~20毫升,蓋嚴(yán)。將培養(yǎng)皿平置,冷卻后成一光滑平面,俗稱“平板”?!捌桨濉崩鋮s至30℃以下時(shí),接入待脫毒菌種。接種方法:挑取米粒大小的一塊種源,接入“平板”邊緣。接種后置于規(guī)定的溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)菌絲萌發(fā)至2厘米長時(shí),用尖刀接種工具切取菌絲尖1毫米左右,接入新制“平板”上。此為一次脫毒。一般可連續(xù)脫毒3~4次。脫毒次數(shù)越多,脫毒效果就越有保證。
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